养猪场非洲猪瘟变异株监测技术指南

国家非洲猪瘟参考实验室

为指导养猪场做好非洲猪瘟监测工作，及时发现非洲猪瘟病毒特别是变异株感染情况，提升非洲猪瘟防控能力，特制定本技术指南。

一、非洲猪瘟变异株的定义

非洲猪瘟变异株包括基因缺失株、自然变异株、自然弱毒株等，与2018年传入的非洲猪瘟毒株相比，该类毒株的基因组序列、致病力等发生**变化。生猪感染该类毒株后，潜伏期延长，临床表现轻微，后期可出现关节肿胀、皮肤出血型坏死灶，感染母猪产仔性能下降、死淘率增高，出现流产死胎/木乃伊胎等。与传统的流行毒株相比，生猪感染该类毒株后排毒滴度低、间隙性排毒，难以早期发现。

二、监测方法

(一)加强临床巡视

时刻关注猪场各个环节猪只异常情况，想方设法提升饲养人员责任心，一旦发现猪只出现嗜睡、轻触不起、采食量减少，发热、皮肤发红、关节肿胀/坏死、咳喘、腹式呼吸，育肥猪死淘率增高，母猪流产或出现死胎/木乃伊胎等可疑临床表现时，应**时间采样检测。

(二)改进主动监测

每周对猪群进行病原和抗体检测。在猪群进行疫苗接种、转群、去势，或母猪分娩后，应进行采样检测。猪场出现风险暴露或周边猪场出现感染时，按需进行采样检测。

(三)抽样策略

对可疑猪的同舍和关联舍猪群，采集深部咽拭子和抗凝血，进行病原检测，必要时采集血清进行抗体检测。对可疑猪及临近猪接触的地面、栏杆，以及舍内人员接触的物品等，采集环境样品进行病原检测。病原检测如果混检，建议混样数量不超过5个;抗体检测不得混样。

(四)样品选择

对可疑猪，按检出概率高低排序，依次采集深部咽拭子、淋巴结(微创采集)、前腔静脉抗凝血(EDTA)或尾根血、口鼻拭子。

对分娩母猪，应采集脐带血、胎衣;对死胎和流产胎儿，应采集淋巴结、脾脏等组织样品。

对病死猪，优选采集部位为淋巴结、脾脏、骨髓和肺脏。

血清样本，按常规方法制备。

三、检测方法

(一)病原检测方法

采用非洲猪瘟病毒(P72/CD2v/MGF)三重荧光PCR方法检测核酸，详见“农办牧〔2020〕39号”附件《非洲猪瘟病毒流行株与基因缺失株鉴别检测规范》。必要时可测序鉴别。

(二)抗体检测方法

采用间接ELISA、阻断ELISA等方法检测抗体水平，详见《非洲猪瘟诊断技术》(GB/T 18648)。