牛病毒性腹泻检测试剂盒

本试剂盒以双抗原夹心ELISA为基础。96孔酶标板中包被牛病毒性腹泻P80蛋白，加入待测样本进行孵育。如果待测血清含有较高滴度的牛病毒性腹泻抗体，会被酶标板上包被的P80蛋白捕获。洗涤后加入酶结合物（辣根过氧化物酶标记的P80蛋白），若有抗体被捕获到酶标板上，酶结合物就会与抗体结合，加入底物与过氧化物酶反应，通过显色来判断结果。

 取出酶标板，记录样品的位置。
 样品用血清稀释液1:10稀释，取100μl稀释好的样本加入酶标板孔中。（可在稀释板中加入180ul血清稀释液，再加入20μl样本，充分混合均匀）。
 在适当的两孔中加入100μl未稀释的阴性对照。
 在适当的两孔中加入100μl未稀释的阳性对照。
 用封板膜密封酶标板，37℃孵育30min。
 弃去板孔中的液体，用300μl洗涤液洗板，重复5次。最后一次洗板后将液体**拍干。
 每孔加入100μl酶结合物，盖好封板膜，37℃孵育30min。
 弃去板孔中的液体，用300μl洗涤液洗板，重复5次。最后一次洗板后将液体**拍干。
 每孔加入100μl底物溶液, 盖好反应板，室温避光孵育10min。
 每孔加入50μl终止液终止反应。
 测量并测定样品和对照于450nm波长的吸光值(OD450nm)。