国家二类新兽药：盐酸沃尼妙林

[欧洲**批准允许在饲料中长期添加的抗生素]

国家二类新兽药：盐酸沃尼妙林

河北远征药业有限公司

沃尼妙林是**一代截短侧耳素类半合成抗生素，在欧洲是**允许在饲料中长期添加使用的抗生素类药品。2010年9月9日，农业部1457号公告批准我国研制的盐酸沃尼妙林原料及制剂被农业部批准为国家二类新兽药，该新兽药由河北远征药业有限公司研制。

一、研发历程
（一）立项背景
沃尼妙林(valnemulin)是属二萜烯类药物，与泰妙菌素属同一类，是动物专用抗生素，主要用于防治猪、牛、羊及家禽的支原体病和革兰氏阳性菌感染。
该药物1984年首先由Sandoz公司合成，1999年由欧共体批准用于预防与治疗由猪痢疾短螺旋体感染引起的猪痢疾，以及由肺炎支原体感染引起的猪地方性肺炎；2004年1月被欧共体批准预防由结肠菌毛样短螺旋体感染引起的猪结肠螺旋体病(结肠炎， colitis)和由胞内劳森菌引起的猪增生性肠炎。主要剂型为预混剂，而且该药是欧洲药品审评委员会**批准允许在饲料中长期添加使用的抗生素。
并且有关文献报道，沃尼妙林对猪肺炎支原体的MIC90为0. 000 5微克/毫升，是泰妙菌素(MIC90为0. 05微克/毫升)的1/100 ；对猪螺旋体性结肠炎的MIC90为0. 5微克/毫升，是泰妙菌素(MIC90为1. 0微克/毫升)的1/2 。并且沃尼妙林吸收快，靶组织药物浓度高，消除迅速，残留低，毒性小。
大量的试验数据已经证明沃尼妙林**、**、质量可控，是目前兽医临床**的截短侧耳素类抗生素，但国内并无原料及制剂上市销售。在此形势下，河北远征药业有限公司通过调研分析市场前景后决定着手对盐酸沃尼妙林项目展开研究。
（二）研制过程
2008年初始，远征药业筹资专项资金300万元启动盐酸沃尼妙林研究项目，汇集一批具有硕士学位、高级职称的专业技术人员组成了课题组，进行了盐酸沃尼妙林原料合成、制剂工艺研究、药理毒理研究、药代动力学研究、临床试验、药物残留试验等工作。2009年申报材料递交至农业部审评中心，经过初审、质量复核、复审，三次上农业部新兽药专家审评会，最终通过专家评审，盐酸沃尼妙林原料及其预混剂取得了新兽药证书，证书号为：（2010）新兽药证字28号、29号。
任何一项科学研究都不是一帆风顺的，盐酸沃尼妙林项目也是如此，由于盐酸沃尼妙林物料具有引湿性强、粉末刺激性强、对光不稳定等性质，这为制剂研究带来了一系列问题。
首先是产品质量达不到**期，降解严重；再者就是饲喂过程中，适口性差，影响临床应用。为**制剂的稳定性、有利于兽医临床应用，经过查阅国内外文献资料，最后确定对盐酸沃尼妙林进行包衣处理，并投资购入流化床包衣设备。颗粒包衣在国内兽药生产中虽已有应用，但应用范围很小，课题组人员边查阅资料，边进行包衣试验，经过努力，终于确定了以羟丙甲基纤维素为包衣物质的包衣溶液处方以及盐酸沃尼妙林包衣工艺，并且经有关试验证明，沃尼妙林包衣后能够达到掩味、掩盖刺激性、**制剂稳定性的目的。

二、制剂特点及作用机理
（一）剂型特点
沃尼妙林口服，可被**吸收，分布于各组织，其生物利用度为100%。预混剂是畜禽口服给药的主要剂型，与注射剂相比，给药方便，可避免动物的应激，减少人力物力，节约了养殖成本。
（二）作用机理
截短侧耳素类是一种由真菌即一种食用菌产生的抗菌剂，其绝大部分衍生物还未被开发，目前只有三种用于人和兽医临床。人用此类药物也只有Retapamulin于2007年被美国FDA批准，作为局部外用药治疗葡萄球菌和化脓链球菌感染的脓包病，兽医临床使用的此类药物有泰妙菌素和沃尼妙林。
此类抗生素独特的作用机制，即通过与原核生物的核糖体结合对细菌蛋白合成产生抑制作用，与其它作用于核糖体的抑制剂不同，该类抗生素与病原微生物核糖体的23SrRNA的V区相互作用，阻止了肽基转移酶正确定位于tRNA的CCA末端，从而抑制了病原微生物蛋白质的合成，导致其死亡，因此，此类药物与其它抗生素之间不存在交叉耐药性。

三、**性试验
（一）盐酸沃尼妙林预混剂的急性毒性试验
EMEA公布沃尼妙林口服急性毒性为中等至低等毒性。SD大鼠的口服LD50大于1000毫克/千克体重，小于2000毫克/千克体重；雌雄小鼠的口服LD50分别为1482毫克/千克体重和 1710毫克/千克体重。中毒后表现为行为迟缓、毛发直立、共济失调和呼吸困难。
公司研发人员对自产的盐酸沃尼妙林进行了SD大鼠和ICR小鼠经口急性毒性的研究，结果SD大鼠的LD50为1584.89毫克/千克体重，雌雄ICR小鼠经口LD50分别为1480.10毫克/千克体重和1698.24毫克/千克体重。
试验结果与EMEA公布的沃尼妙林LD50一致。
（二） 猪饲喂盐酸沃尼妙林预混剂的**性试验
试验选取健康长大白猪20头，随机分为4组，混饲盐酸沃尼妙林预混剂（10%），沃尼妙林添加量为0.02%、0.06%和0.12%，连续饲喂21天。饲喂期间观察其采食、行为、呼吸和排泄，各剂量组均未见异常。
分别于给药前、给药21天、停药后的第3天和第5天检测血液生理生化指标，并取肌肉、肝脏、肾脏、心脏、肺脏、脾、淋巴结、空肠、回肠、盲肠、十二指肠、骨、骨髓、脑等作组织病理切片。经统计分析，血液的各项生理生化指标在给药前后差异不显著；空白对照组和用药组各器官和组织学变化基本一致，无显著差异。结果表明，沃尼妙林在0.02%~0.12%的剂量范围对血液生理生化指标和组织器官没有**影响。
综上所述，盐酸沃尼妙林按15毫克/千克体重剂量（即0.03%混饲）给猪饲喂无任何不良反应。
（三）盐酸沃尼妙林预混剂的残留消除试验
试验挑选健康杂交长大白猪30头，以200毫克/千克(以沃尼妙林计)饲料添加剂量连续给药21天，残留检测方法为HPLC法。检测结果表明，盐酸沃尼妙林在猪肌肉中消除较快，在肝脏和肾脏中消除较慢，且残留浓度远高于肌肉和脂肪，说明沃尼妙林主要经肝脏和肾脏代谢。
在停药后第0.5天，肌肉组织中药物残留量均低于欧盟规定**残留量（MRLs）；而肝脏和肾脏中药物残留量比较高，肝脏中药物残留量范围为50.5微克/千克到227.0微克/千克，均低于MRLs；而肾脏中残留量范围为65.8微克/千克到107.7微克/千克，有一头动物的残留量高于MRLs。
在停药后1天，只有2头动物肌肉组织中检测到药物残留，但均低于MRLs，仅有2头动物的肝脏中沃尼妙林残留高于定量限（LOQ），均低于MRLs，有2头能检测到肾脏组织中的沃尼妙林残留量，也均低于MRLs；在停药后第2天，虽然在部分动物肌肉、肝脏和肾脏组织中均能检测到沃尼妙林残留，但已低于LOQ，而到停药后第3天，所有动物组织中均检测不到沃尼妙林残留。

四、盐酸沃尼妙林预混剂的临床效果试验
对盐酸沃尼妙林预混剂进行的临床**性评价，主要针对我国养猪临床中常见的猪支原体性肺炎（猪喘气病）和猪痢疾。
猪喘气病临床试验 选取自然感染病猪140头，随机分为5组，分别为沃尼妙林高（0.04%）、中(0.03%)、低(0.02%)三个剂量组、对照药物(延胡索酸泰妙菌素0.03%)组和空白对照组，连续用药3周。
结果表明，盐酸沃尼妙林对治疗猪喘气病有治疗效果，高、中剂量组的**率均为100%，**率均大于85%，与泰妙菌素（0.03%）治疗效果相当；而低剂量组的**率仅为21.4%。说明，沃尼妙林的高中剂量均可**猪的日增重和料肉比，但考虑到用药成本，建议该产品在猪喘气病的临床治疗时，按0.03%混饲，连用3周。
猪痢疾临床试验 选取自然感染病猪120头，随机分为5组，分别为沃尼妙林高（0.01%）、中(0.0075%)、低(0.005%)三个剂量组，对照药物(延胡索酸泰妙菌素0.01%)组和空白对照组，连续用药10天。
结果表明，盐酸沃尼妙林预混剂可**治疗猪痢疾，高、中剂量组的**率均为100%，**率均大于95%，而低剂量组治疗效果稍差，**率为70%，**率仅为50%。说明，高、中剂量组均可**猪的日增重和料肉比，考虑到用药成本，建议临床治疗猪痢疾时，按0.075%混饲，连用10天。