猪蓝耳病发病机理及**非特异性免疫重要性

图一  蓝耳病病毒（PRRSV）
 
1  蓝耳病（PRRS）的发病机理
蓝耳病病毒（PRRSV）进入机体后，侵入肺泡巨噬细胞，造成严重的间质性肺炎，入侵的第二天**造成肺的损害，7天后损伤整个肺尖叶，呈多中心病状，病毒侵入细胞后在细胞内增殖，使巨噬细胞破裂，溶解崩溃，造成巨噬细胞数量减少，肺泡壁增厚，淋巴组织呈衰竭状态，同时**了肺泡巨噬细胞对其他细菌和病毒免疫力。另外，因为毒株的变异，导致免疫细胞识别能力**，从而逃避抗体的作用，极易继发或并发其它疾病，使病情非常复杂。
 
图二  正常巨噬细胞（Healthy macrophage）
 
图三  巨噬细胞被PRRSV攻击破裂（Unhealthy macrophage）

2      非特异性免疫与巨噬细胞
2．1  非特异性免疫
在进化过程中形成的、天生即有、相对稳定、无特殊针对性的对病原微生物的天然抵抗力，称为非特异性免疫或先天免疫。非特异性免疫主要由体的屏障结构（血脑屏障、胎盘屏障）、吞噬细胞的吞噬功能、正常组织和体液中的抗菌物质以及炎症反应等所组成。其中吞噬细胞包括大吞噬细胞（即单核巨噬细胞）和小吞噬细胞（即中性粒细胞）。
2．2        巨噬细胞及其特点
2．2．   1  巨噬细胞
巨噬细胞（Macrophage，Mφ）由单核细胞发育而成，成熟后的体积较大。游离于血液中与固定在不同组织中的巨噬细胞其形态与名称不同。在光学显微镜下，可见有圆形或其他形状的核，染色质较浓缩，经特殊染色还可见到线粒体、高尔基体和中心体等。在电子显微镜下，还可进一步看到内质网、溶酶体、微丝、微管和吞噬体等。
巨噬细胞在机体免疫中有着极其重要的作用。最初只知道它有吞噬外来异物的作用，因此只认为是一种非特异性的免疫作用。随着研究的深入，发现其在协同T、B淋巴细胞参与特异性免疫反应及在抗感染方面都有着重要的作用。
2．2．2       巨噬细胞特点
巨噬细胞具有多种免疫功能，它可吞噬消灭入侵的病原体、有害异物，清除损伤、衰老、死亡和突变细胞及代谢废物，能加工、提呈抗原给淋巴细胞。所以特异性免疫功能是建立在非特异性免疫功能基础之上，使机体免疫功能进一步完善。巨噬细胞之所以能完成这些功能是由于它具有三个特点：
（1）巨噬细胞是机体最早识别外来异物的细胞。人们惊异地发现，巨噬细胞可以识别和吞噬**各样的外来的或“自身”的物质，没有这种广泛而**的识别，也就谈不上免疫系统对抗原物质的免疫应答和**保护。研究表明这种识别的基础是在巨噬细胞膜上存在很多的受体（表1），这种能力是在物种系统发生中逐渐形成的。
表1  单核巨噬细胞膜上的受体性能
受体名称 结合对象 对胰酶敏感性 主要功能
Fc受体Ⅰ（FcR Ⅰ） IgG2a 敏感 ADCC、调理、吞噬
Fc受体Ⅱ（FcR Ⅱ） 聚合IgG、IgG1、IgG2b 不敏感 ADCC、调理、吞噬
Fc受体Ⅲ（FcR Ⅲ） IgG3   ADCC、调理、吞噬
IgM受体（Fc μ R） 单体或完整IgM   ADCC、调理、吞噬
补体C3b受体（C3bR） C3b、C3c   ADCC、粘连、吞噬
补体C3d受体（C3bR） C3b、C4   ADCC、粘连、吞噬
**淋巴因子受体 MIF、CSF、LDCF（1）   见注（1）
淋巴细胞受体 T、B细胞   细胞间相互激活
聚合蛋白受体 聚合的蛋白   转接异物，加速吞毁
连接蛋白受体（FNR） 连接蛋白（FN）   促进内吞，消除病原
高密度脂蛋白受体 高密度脂蛋白   
乳铁传递蛋白受体 乳铁蛋白   
唾液糖蛋白受体 唾液糖蛋白   
胰岛素受体 胰岛素   
纤维蛋白原受体 纤维蛋白质   
其他**受体 见注（2）   见注（2）
注：（1）MIF可阻止巨噬细胞游动。CSF可促进单核巨噬细胞生长，LDCF（淋巴细胞衍生的趋化因子）招引单核巨噬细胞趋向异物；
（2）包括对**激素、神经肽、多糖质、糖蛋白、脂蛋白及脂多糖的受体，可调控单核巨噬细胞功能。
 
（2）巨噬细胞具有多种胞内酶和胞外酶(表2)，使之**地消化、**被吞噬进入细胞内的病原体及异物。
表2  单核巨噬细胞的酶类及其功用
酶系名称 主要功能
溶酶体水解酶 
组织蛋白酶B（cathepsin B）
 细胞内水解消除吞噬的异物及病原体   细胞外破坏炎症组织
透明质酸酶（hyaluronidase） 
糖苷酶（gucosidase） 
脱氧-/核糖核酸酶（DNase/RNase） 
  
溶酶体中性蛋白酶 
胶原蛋白酶（collagenase） 促进创伤愈合
弹性蛋白酶（elastase） 降解弹性蛋白
血纤维蛋白溶酶原激活剂（PA） 促进溶解血块
血管紧张素转化酶（angiotensin C se） 促进**血压
溶酶体脂酶 
脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase）
 降解脂质及磷脂、消除内毒素脂多糖    氧化及催化Cl-水解杀菌
磷脂酶（phospholipase） 
溶菌酶（lysozyme） 
髓过氧化物酶（myeloperoxidase） 
胞外酶 
核苷酸酶（nucleotidase）
在细胞外进行物质代谢，供给养分及能量
亮氨酸氨肽酶（leucine aminopepto dase） 
碱性磷酸酯酶（alk.phophoesterase） 
精氨酸酶（arginase） 
脱氨酶（deaminase） 
其他酶类 
（3）巨噬细胞还可以分泌很多活性物质，其分泌产物之多，可与肝细胞相比拟。这些分泌产物对组织、细胞起着重要调节作用（表3）。
表3  巨噬细胞的分泌产物
1 . 单核因子（mo nokines） 5 . 细胞外基质及连接蛋白
IL-1＝LAF 纤维连接素（Fibronectin）
IL-3＝CSF 95000明胶结合蛋白
IL-6＝BCDF 凝血扬升素（thrombospodin）
干扰素（IFN-α/y）＝MAF 6 . 反应性中间物
肿瘤坏死因子（TNF） 超氧化物（superxide）
2 . 激素（normones）样物 过氧化氢（H2O2）
前列腺素（PGE2，PGF2a） 羟基（hydroxylradical）
凝血噁烷（thromboxane） 亚硝酸盐、硝酸盐
白三烯（leukotriene） 7. 生长因子及活化因子
花生四烯酸（eicosatetraenoicacid） 粒细胞集落刺激因子（G-CSF）
促肾上腺皮质激素（ACTH） 中性粒细胞活化因子（NAF）
胰岛素样物（insuline-like） 单核细胞/巨噬细胞集落刺激因子（G/M-CSF）
胸腺素B4（thymosine B4） 促红细胞生成素
β-内啡肽（β-endorphin） 细胞集落增强因子
二羟基维生素D 成纤维细胞生成因子、活化因子及转化因子
3 . 补体（comlement, C）成分 浆细胞瘤生长因子
C1、C2、C3、C4及C5 血小板衍生的生长因子
备解素（P）、B因子、D因子 谷胱甘肽（glutathione）
抑制物：C3b抑制物、β 1H 8 . 酶及细胞抑制物
补体裂解成分（由Mφ蛋白酶裂 蛋白酶抑制物
解）：C3a、C3b、C5a、Bb a1抗胰蛋白酶
4 . 凝血因子 a2巨球蛋白（a2M）
凝血因子V、V11、1X及X  胶原蛋白酶抑制物
凝血酶原、凝血酶原酶 磷脂酶抑制物
组织因子、血纤维蛋白溶酶 脂调节素（lipomodulin）
抑制物、血纤维蛋白溶酶 1L-1抑制物
原激活剂及抑制物 
9 . 嘌呤及嘧啶产物 转铁蛋白（transferrin）
胸腺嘧啶脱氧核苷（dT） 同族铁蛋白（isoferrin）
脱氧胸苷（deoxycytidine） 转钴胺素Ⅱ（rtanscobalamine Ⅱ）
尿嘧啶（uracil）尿酸 脱辅基脂蛋白E（apolipopreotein E）
新蝶呤（neopterin） 脂质转移蛋白（lipid transfer preotein）
10 . 其他结合蛋白 亲和素（avidin）
3  特异性免疫与蓝耳病
3．1  特异性免疫
特异性免疫又称获得性免疫或适应性免疫，是经后天感染(病愈或无症状的感染)或人工预防接种(菌苗、、类毒素、免疫球蛋白等)而使机体获得抵抗感染能力。一般是在微生物等抗原物质刺激后才形成的(免疫球蛋白、免疫淋巴细胞)，并能与该抗原起特异性反应。主要参与细胞是T、B细胞和抗原提呈细胞。
在抗原刺激下，机体的特异性免疫应答（体液免疫或细胞免疫），一般可分为感应阶段、反应阶段和效应阶段。
感应阶段是对抗原的识别及处理阶段。绝大多数抗原物质**次进入机体后，须经巨噬细胞处理后将抗原信息传递给免疫活性细胞（T细胞、B细胞）。
反应阶段是免疫活性细胞接受抗原刺激后，进行分化、增殖，产生大量致敏T细胞和B细胞，由B细胞产生抗体的阶段。此阶段尚有少量细胞停止分化、增殖，成为保留抗原信息的记忆细胞。
效应阶段是致敏T细胞及抗体发挥免疫功能的阶段。当再次遇到相同抗原时，致敏T细胞直接作用于抗原，同时释放出多种淋巴因子，消灭抗原，发挥细胞免疫的作用。而抗体可直接作用于抗原，或与巨噬细胞、补体等协同作用，**或破坏抗原异物，发挥体液免疫的功能。
 
 
图四  巨噬细胞加工、处理和递呈抗原

3．2  蓝耳病
随着PRRS的发现，PRRS的研究也就随之开展，对于蓝耳病的免疫现在养界的说法很多，到底应不应该注射，在的选择上是应用弱毒苗还是灭活苗，每个人都有自己的看法。
目前，世界上商品化的PRRS有弱毒苗和灭活苗两类。
弱毒苗的缺点是：把它注射入体内的效果与感染野毒没有多大差别。对完全蓝耳病阴性的场或已经是蓝耳病阳性的，当注入另外一种毒株的的PRRS后，它会同野毒一样照样穿过胎盘侵害胎儿。有时，如果我们所使用的的基因序列与某一群体存在的PRRS病毒基因序列相似性达到70%～80%时，会比较**。如果我们所使用的的基因序列与我们本场存在的PRRS病毒基因序列不同时，则意味着可能会有一场新的蓝耳病到来。Botner等报道，在丹麦，对1000多头PRRS血清学阴性使用了弱毒，可是不久后群发生了PRRS，而且从流产胎儿和死胎中分离到了病毒，发现病毒可经胎盘感染胎儿，并向未接种的母传播，有些群则表现出急性PRRS样综合症状。Opriessnig报道从一个多次接种Ingelvac PRRS MLV的场发生PRRS后分离到一株PRRSV 98-38803，并证实该毒株来自于Ingelvac PRRS MLV。所以PRRS弱毒的毒力返强的可能性是存在的。从以上结果来看，PRRS弱毒免疫产生期快，在控制PRRS临床症状上**好于PRRS灭活。但PRRS强毒和弱毒在体内的反应过程是一致的，所以长期使用PRRS弱毒所带来的**问题仍是目前PRRS免疫中**的争议。
灭活苗的缺点是：免疫剂量大、免疫次数多、免疫力产生期较长，诱导**免疫力的能力比较差。但毫无疑问，灭活苗在使用上是比较**的，可以诱导一定的抗体产生，如果抗体与野毒的基因序列比较相似，同样还会产生保护；如果基因序列不相似，则保护力比较差。
这就是这两种的不同之处，了解到他们的缺点后我们在生产实践中就要避免它。所以要根据每个场不同的情况来选择。灭活苗的**性**高于弱毒苗，而且不存在散毒的危险，然而再好的灭活苗的效果也不能和弱毒苗的效果相比较的。所以对于种和阴性场应该选用灭活苗，而阳性场为了净化蓝耳病**选用免疫效果好的弱毒。
专家之音
南方农村报：当前，不少地方场出现接种蓝耳病(尤其是弱毒苗)后大量死的现象，这是否意味着弱毒苗有很大的危险性？
樊福好：我个人觉得，接种只是防控高致病性蓝耳病的权宜之计，市场上个别厂家的产品也存在着灭活灭活不完全、弱毒混有强毒的情况，建议户在选用产品时，一定要慎重。
从理论上说，弱毒苗虽然在实际效果上会好于灭活，但是在目前的情况下，蓝耳病的免疫还存在着许许多多的问题尚未解决，匆匆忙忙推荐某些(弱毒或灭活)的做法值得商榷。
目前针对所谓新变异毒株的主要是灭活，其免疫效果，我个人不太了解。
减少养生产中抗生素的使用，减少过多种类的接种，反而是当前**群免疫水平的**途径之一。
袁世山：这种打苗(尤其是应急免疫)后发病的情况可能会出现。主要原因包括：**，免疫程序(亦即打苗时机及剂量)不当：严格来说，应急免疫对蓝耳病效果不好，但如果进行，建议越早越好；注苗前已感染的肯定是要发病乃至死亡的；另外，因为蓝耳病保护性免疫应答迟缓，一般需要3-4周才能起作用，在此期间内感染也会发病或死亡。第二，慎选，正规质量较好，一般**力过高或返强问题。
杨汉春：关于蓝耳病活的使用在生产上应慎重，从国家相关单位的试验结果来看，现有的活对流行的变异毒株的免疫保护率不好；至于变异毒株的灭活苗，已有的数据表明，对变异毒株具有较高的免疫保护率，但在实际生产中的免疫效果如何还需要进一步验证，对其他蓝耳病病毒毒株的免疫效果如何还缺乏实验室数据，因蓝耳病病毒本身就容易变异，不同毒株之间的交叉的免疫保护效果就不是**，这也是防治蓝耳病的难题所在。至于自家组织苗，我认为规模化场可以采用这一措施，用采自场本身发病死亡的组织制成灭活苗(但要灭活**)用于本场的免疫，也不失为一种**的方法，但**不要用于其他场。
 
 
图五  蓝耳病导致耳朵发绀，母流产
4  非特异性免疫与特异性免疫的比较
非特异性免疫与特异性免疫之间有着极为密切的联系。以抗病原体来说，非特异性免疫是基础，它的特点是出现快，作用范围广，但强度较弱，尤其是对某些致病性较强的病原体难以一时消灭，这就需要特异性免疫来发挥作用。特异性免疫的特点是出现较慢，但是针对性强，在作用的强度上也远远超过了没有针对性的非特异性免疫。由于机体在任何时间、任何地点，都有可能接触到**各样的异物，如果全部都以特异性免疫来对付，机体的消耗就会过大，因此先以非特异性免疫来处理，对机体更为有利。
特异性免疫是在非特异性免疫的基础上形成的。例如，进入机体的抗原，如果不经过吞噬细胞的加工处理，多数抗原将无法对免疫系统起到刺激作用，相应的特异性免疫也就不会发生。此外，特异性免疫的形成过程，又反过来增强了机体的非特异性免疫。非特异性免疫与特异性免疫区别见表4。
表4  非特异性免疫与特异性免疫区别
  非特异性免疫 特异性免疫
范围 机体对内外异物都可以发生免疫反应 机体仅对某一异物（抗原）产生免疫反应
细胞组成 黏膜和上皮细胞、吞噬细胞、NK细胞 T细胞、B细胞
作用时间 立刻-96**内 96**后
作用特点 非特异作用，抗原识别谱广，不经克隆扩增和分化，**发挥免疫效应 特异性作用，抗原识别专一、经克隆扩增和分化成效应细胞，发挥免疫效应
作用时间 无免疫记忆，作用时间短 有免疫记忆，作用时间长
特性 非专一性 专一性
5  **非特异性免疫重要性
在实际生产中我们往往关注特异性免疫，较少重视非特异性免疫。例如，在发生疫病传染时，习惯只用**方法测抗体，如凝集试验、酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫荧光法（IFA）、血清病毒中和试验（SVN）等等。认为抗体上来了就不会发生该病，殊不知在抗体水平合格的情况下还可以发生潜伏感染，如伪狂犬病毒（PRV）的毒株感染。巨细胞病毒（PCMV）可在高水平循环抗体存在下排毒。还有不少场，免疫后部分群体抗体水平始终上不来，人们多归咎于质量和免疫程序等，很少考虑机体免疫抑制，尤其是巨噬细胞的功能状态。而巨噬细胞在特异性体液免疫应答过程中中扮演了重要角色，起着递呈抗原的作用，巨噬细胞的功能低下将影响特异性免疫，**免疫应答，见图四。
蓝耳病病毒首先摧毁巨噬细胞功能，使得的非特异性免疫受损，继而影响特异性免疫，使产生免疫抑制。另外，应激因素、霉菌毒素、有害金属等也是引起机体免疫抑制的原因，削弱了非特异性免疫功能，使得免疫应答反应机制不完善，很多情况下超剂量接种也无法收到预期效果。因此增强机体自身免疫力，**非特异性免疫功能才是蓝耳病及众多免疫抑制病（如圆环病、伪狂犬病）防治的根本出路。
6、传奇    增强动物非特异性主动免疫功能
传奇是辉腾国际研发中心和中国农业大学、美国伊利诺斯州立大学学院合作研发的动物非特异性主动免疫功能增强剂，根据中医免疫学原理，采用基因生物、免疫调节剂和多活性生物反应修饰技术，从天然植物提取活性多糖，采用**的调节机体免疫功能α-甘露聚糖肽，肠道免疫功能的甘露寡糖，通过科学最**的组合成一种新型动物专用非特异性主动免疫功能增强剂。
作用机理：
1、 黄连解毒散中的多味中药具有显著增强网状内皮系统的吞噬功能，**巨噬细胞激活率，增强巨噬细胞吞噬异物及消化异物的功能；**机体细胞诱生干扰素的功能，促进抗体形成，对非特异性免疫（体液免疫、细胞免疫）功能有**的调节作用；
2、 α-甘露聚糖肽是世界广泛应用的免疫调节剂和多活性生物反应修饰剂，具有增强免疫力，诱导机体产生干扰素，调节机体免疫功能，促进抗体形成，增强机体抗病力。
3、 甘露寡糖（MOS）通过防止病原菌附着在肠道上，“清洗”已附着在肠道上的病原菌，调节免疫应答，改善肠道形态学结构来**动物的生产性能，达到肠道免疫增强作用。
四大功效：
1、 **提机体升免疫功能，**防止免疫抑制性疾病的发生。
预防免疫抑制性疾病如高致病性蓝耳病、伪狂犬病、瘟、流感、圆环病毒病、支原体等，以及继发副嗜血杆菌病、链球菌病、气喘病等所致的无名、呼吸道综合征、断奶仔多系统衰竭综合征预防和控制。
2、 提升的抗体水平，促进机体免疫抗体生成，**效价。本品通过诱导免疫淋巴细胞成为免疫活性细胞（T细胞、B细胞等），激活机体免疫应答，**免疫体系中IgA、C3水平，使机体内的cGMP升高、cAMP****，促进抗体生成。
3、 清除体内毒素，调节肝肾功能。本品通过对消化道和体内自由基的清除, 改善血管的通透性和输血功能, **肝肾心肺等重要器官排除体内自由基和代谢废物的负担，减轻抗生素对机体的毒副作用及残留。
4、 抗应激、增强肠道免疫功能， 富含的多种免疫因子能增强骨髓的造血机能和红细胞的携氧能力，能**改善皮肤表面的血液循环和微循环，从而使皮肤红润有光泽、有很强的抗应激能力。
7、**非特异性免疫场保健方案：
1 哺乳仔的药物保健方案
     三针保健，母产前产后，仔1日龄、7日龄、21日龄时，每次每头肌注头孢噻呋钠1次实施三针保健。仔2日龄，用伪狂犬病双基因缺失活滴鼻，每个鼻孔0.5毫升。
仔3日龄时，每头肌注牲血素1毫升及0.1％亚硒酸钠－VE注射液0.5毫升；或者肌注铁制剂1－2毫升，可防治缺铁性贫血、缺硒及预防腹泻的发生。
2、保育仔的药物保健
    哺乳仔断奶前后的药物预防方案可延续于保育期间实施，并能获得良好的预防效果。
替可康500g+传奇1kg+金花清感康1㎏，拌料1吨，断奶前后，连用20天.
    保育仔转群全虫驱拌料，驱除体内寄生虫1次。使用免疫小肽素改善肠道功能，提升机体菲特异性免疫力。
3、育肥的药物保健
替可康500g+传奇1kg+金花清感康1㎏，在13－15周龄和18－21周龄。拌料一吨，连用7－10天。育肥中期于1吨中添加内外驱，连喂7天，间隔10天后再喂7天，驱虫1次
     药物保健每月进行1次，每次12天，肥出栏前30天停止加药，在药物保健的间隔时间内可在中加免疫小肽素，每吨中加1000克，可连续饲喂。
4、母保健方案：
1、后备母（断奶至配种）：每吨添加母利健1kg和免疫小肽素1Kg，配种前7天至配种后25天，连续饲喂。可促进母性成熟和体成熟，并促进正常发情
2、怀孕前期（配种后三周）：每吨添加母利健1kg+免疫小肽素1Kg，**受精卵的着床效率，**受胎率和胎产仔数
3、妊娠后期第60-105天的保健：每吨添加母利健1kg+免疫小肽素1Kg，连续饲喂，避免产弱仔，增加仔初生重
4、母产前产后：每吨添加母

利健1kg+利乐乳1kg，连续饲喂。产前1天至产后7天。
母在产前产后配合替可康500g+传奇2kg+产后舒500g，拌料1吨，产前、后连用7天
5、哺乳期：每吨添加母利健1kg+利乐乳1kg+免疫小肽素1Kg，连续饲喂。促进母泌乳，**仔断奶窝重，**断奶后正常发情